Cordeliers Genotyping & biochemistry (CGB)

PRESENTATION

Le CGB est une plateforme multidisciplinaire proposant un service de génotypage, de détection des mycoplasmes ainsi que plusieurs appareils en libre accès :

  • Jess Simple Western
  • Naica R System 6-color dPCR
  • BIORAD QX200 Droplet Digital System,
  • Varioskan™ LUX
  • Tape Station 4200 Agilent Technologies

La plateforme propose des services à façon sur ces même appareils.

Le CGB fait partie du réseau scientifique « Omic » de Sorbonne Université. Il est ouvert à toutes les équipes du CRC et de ses tutelles (Sorbonne Université, Université Paris Cité et INSERM) ainsi qu’aux utilisateurs externes (locaux, régionaux, nationaux, publics et privés).

Le CGB est certifié ISO 9001 depuis décembre 2013, et NFX 50-900 depuis 2020.

-> Service de génotypage

Le CGB réalise les prestations de génotypage de lignées murines transgéniques (hébergées au CFE et dans d’autres animaleries externes) ou d’autres types d’échantillons (culture cellulaire, etc). La plateforme dispose d’un robot de distribution Hamilton MICROLAB STARLET permettant la réalisation des extractions d’ADN et ainsi que les plaques PCR (en 384 puits ou 96 puits). La plateforme est équipée d’un analyseur d’acides nucléiques LabChip GX Touch réalisant les électrophorèses en capillaires afin d’analyser les fragments de PCR.

Pour toutes nouvelles demandes de génotypage merci de remplir les formulaires :

-> Service de détection de mycoplasme

Le CGB propose un service de détection de mycoplasmes afin d’aider les chercheurs à résoudre l’un des problèmes les plus fréquents en culture cellulaire. La plateforme utilise le kit de détection de mycoplasmes MycoAlert (LT07-318) de chez  LONZA afin de réaliser le test et un lecteur mutlimode Varioskan™ LUX pour obtenir les résultats.

-> Réservation d’appareil

Simple WesternTM de Protein Simple  JESS       

La plateforme dispose du Système automatisé de Simple WesternTM de Protein Simple JESS. C’est une technologie innovante de     Bio-Techne, qui effectue des immuno-essais capillaires et des analyses Western blot entièrement automatisées, éliminant la complexité des immuno-essais traditionnels comme le Western blot et l’ELISA. Cette technologie permet de réaliser des Western blot plus rapidement entre 3 à 5h en fonction de la méthode choisie, d’utiliser entre 3µl d’échantillons dilués.

Trois matrices de séparation existent: 2-40 kDa, 12-230 kDa et 66-440kDa.

Différents modules de détection permettent une détection par la HRP, le proche infrarouge (NIR) ou encore l’infrarouge (IR) dans le même capillaire. Des modules de détection des protéines totales permettent de normaliser vos résultats à la quantité de protéines dans les échantillons . Vous pouvez faire du multimeplexing  et du Replex . Les dosages RePlex sont similaires au stripping et au repobing pour un Western blot, mais sans perte d’échantillon. Le Jess permet une multitude d’applications possibles allant du western classique à l’analyse de la pureté de préparation à usage thérapeutique .

Naica R System 6-color dPCR                               

La plateforme dispose du Système automatisé de Crystal Digital PCR™ « Naica R system 6-color dPCR » qui met de quantifier de façon absolue plusieurs cibles génétiques en une seule exécution.  Le système naica® est une plateforme dPCR simple d’utilisation qui exploite une technologie microfluidique de pointe pour intégrer le flux de travail dPCR sur une seule puce consommable. Les échantillons  sont divisés en un large éventail de milliers de cristaux de gouttelettes individuels, chacun possédant son propre compartiment de réaction, avant l’amplification des molécules d’acide nucléique dans chaque cristal de gouttelette. Ces réactions sont marquées avec des fluorophores pour être lues à l’aide de six canaux de lumière fluorescente différents.

Cela permet un flux de travail rapide et simple qui offre une capacité de multiplexage élevée avec une sensibilité puissante tout en réduisant le temps d’obtention des résultats et en économisant un échantillon précieux.

La PCR numérique a prouvé son adaptabilité dans de nombreux tests moléculaires et est désormais reconnue comme une méthode fiable non seulement pour la détection d’allèles rares et de mutations rares, mais également pour le génotypage, la quantification absolue et la variation du nombre de copies.

Le système naica® a été mis en œuvre avec succès dans une grande variété d’applications :  Cancer et biopsie liquide, Thérapie cellulaire et génique, Détection des maladies infectieuses, OGM et tests environnementaux.

BIORAD QX200 Droplet Digital System              

Le système de PCR numérique à gouttelettes QX200 consiste à diviser l’échantillon en 20 000 gouttelettes de la taille d’un nanolitre. Chaque gouttelette agit comme une réaction PCR individuelle. Après l’amplification par PCR, les gouttelettes sont analysées pour déterminer la fluorescence afin de déterminer la présence de l’ADN cible permettant une quantification absolue basée sur le nombre de gouttelettes positives.

Le partitionnement des gouttelettes par la technologie QX200 Droplet Digital réduit les biais dus à l’efficacité de l’amplification et aux inhibiteurs de PCR.

Varioskan™ LUX                                                      

Le Varioskan LUX  de chez Thermo Scientific est un lecteur de microplaques multimode qui combine simplicité et performances haut de gamme pouvant lire  :

§des Absorbances de 200 à 1000 nm

§des Intensités de Fluorescence allant de 270 à 870 nm (longueur d’onde d’émission).

§de l’Intensité de Fluorescence en temps résolu de 400 à 700 nm

§de la Luminescence de 360 à 670 nm

§de l’Aplha de 400 à 660 nm

Cet appareil est équipé d’un incubateur/agitateur

Tape Station 4200 Agilent Technologies            

Le système 4200 TapeStation est une plate-forme d’électrophorèse automatisée à haut débit éprouvée pour le contrôle de la qualité des échantillons d’acide nucléique. Il permet une analyse entièrement automatisée, facile et fiable des échantillons d’ADN et d’ARN jusqu’à 96 échantillons par cycle. Le système 4200 TapeStation offre une solution complète pour un véritable contrôle de la qualité des échantillons de bout en bout dans les flux de travail de séquençage de nouvelle génération (NGS), de biobanque ou de développement de vaccins.

-> Service à façon

NOS MISSIONS

•La mise à disposition des instruments et d’une bonne expertise.

•La prise en charge de prestations complètes réalisées par les agents du CGB.

•Une formation approfondie et personnalisée sur nos équipements et sur nos domaines d’expertise.

•Une aide personnalisée pour la conception et l’interprétation des expériences.

•La collaboration avec les équipes de recherche pour développer des méthodes spécifiques à leurs projets.

•Une veille technologique active pouvant mener à des collaborations pour tester et évaluer de nouveaux équipements et des nouveaux produits.

MEMBRES

OÙ NOUS TROUVER

Bâtiment F escalier 2 ième étage de 8h à 17h

RESERVATION

Site de réservation et de demande de service: https://openiris.io/

Création d’un nouveau compte utilisateur sur Open Iris : contacter Hélène Fohrer-Ting.

e-mail : helene.fohrer-ting@crc.jussieu.fr

PARTNERS

CGB is a member of Omique core facilities network.

The CGB core facility is certified Iso9001:v2015 and NFX-50-900 and it is available to all CRC members, to members of its associated Universities as well as to public and private external users.

Please, contact the CGB core facility for information and details on how to access it.